李娜 高社干
河南科技大学第一附属医院肿瘤内科，河南洛阳 471003
[摘要] 目的 探讨缺氧诱导因子-1 (hypoxia inducible factor-1,HIF-1)与食管癌发生、发展及预后的关系。方法 采用免疫组织化学SP法检测82份食管癌组织与相应癌旁组织（距离病灶5cm）中HIF-1的表达情况，随后分析其与食管鳞癌患者临床病理特征及预后的关系。结果 癌组织、癌旁组织中HIF-1过表达率分别为 51.2 %（42／82），9.8%（8／82）,差异有统计学意义（P<0.05）；HIF-1过表达在不同分化程度及是否伴有淋巴结转移上差异有统计学意义（P<0.05），HIF-1阳性组与阴性组2年生存率分别为64.3（27/42），82.5（33/40）。结论 HIF-1过表达促进食管癌发生、发展并且与食管癌的预后密切相关。
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关键词 食管癌；HIF-1；预后
[中图分类号] R735.1[文献标识码] A[文章编号] 1674-074２（２０１4）04（a）－０080-02
HIF-1普遍存在于人和哺乳动物细胞内。研究表明，在缺氧条件下HIF-1才可稳定表达，HIF-1对肿瘤适应乏氧微环境起着关键作用[1]，人类多数肿瘤组织中由于血管微环境的异常造成血液供应不足而导致缺氧进而诱导HIF-1的高表达。因此为了了解食管鳞状细胞癌组织中HIF-1的表达情况，该研究如下研究探讨HIF-1过表达与食管鳞癌发生、发展及预后的关系。以2011年9月—2013年8月该院收治的82例食管癌患者为研究对象，现报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料
收集该院确诊并行根治术的食管癌患者82例，其中男48例，女34例，年龄40~70岁，平均年龄（55±2.5）岁。对手术切除食管癌标本依次选取癌组织及癌旁组织（距病灶边缘5 cm）制成蜡块。对蜡块进行连续切4 μｍ厚切片10张，随机任选一张切片进行HE染色。收集的食管癌组织82份和相应食管癌旁组织82份用于检测HIF-1。
１．２方法
１．２．１试剂兔抗人多克隆抗体（Abgent公司，产品编号A－AJ1345a）；超敏SP法试剂盒（产品编号KIT-9710，福州迈新生物技术有限公司）。
１．２．２实验方法采用免疫组化SP法首先对切片进行常规的组织脱蜡、脱水、血清封闭，过氧化物阻断内源性过氧化物酶，然后滴加一抗4度过夜、以及辣根酶标记的二抗，随后DAB显色3~5 min并显微镜下观察染色情况，苏木精复染、透明、封片[2]。
１．３实验室观测
每批实验均设阳性和阴性对照，先在低倍镜下观察，然后在高倍镜下进行随机选择，一般选择10个视野，对1 000个癌细胞进行计数，HIF-1a的染色判定标准参照文献[3]。肿瘤细胞胞核或胞质出现棕黄色或棕褐色颗粒着色者为阳性表达。当阳性细胞数>10％则为阳性表达，阳性细胞数<10％则为阴性表达。
１．４统计方法
应用spss17.0软件进行统计学分析处理，计数资料均采用χ2检验。
２结果
２．１HIF-1表达情况
HIF-1主要位于癌细胞胞质／胞核内，与相应抗体结合后显微镜下可观察到棕色颗粒，在癌组织中HIF-1阳性率为51.2 %（42／82），而相应食管癌旁组织中阳性率为2.4%（2／82）。食管癌组与癌旁组比较（P=0.000,P＜0.05），HIF-1过表达率差异有统计学意义；见表１、图１、2。
２．２HIF-1的表达与食管癌患者临床病理特征间的关系
HIF-1阳性表达率与是否伴有淋巴结转移、不同分化程度相比较差异有统计学意义（P=0.012，P=0.001；P＜0.050），见表1。
２．３HIF-1表达及预后
82例食管癌患者术后随访2年，2年生存率分析显示：HIF-1表达阳性组64.3％（27/42）；阴性组生存率82.5％（33/40）。
３讨论
食管癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，由于多数食管癌患者早期症状不明显，确诊时已为局部进展期，或已发生远处转移，因此发病率以及死亡率都比较高。研究食管鳞癌的发病机制，同时寻找食管癌患者预后评价指标，这样可以及时采取相应的干预措施，将有益于改善食管癌患者预后及生存期。根据[3]Ｍｅｔａ数据分析结果发现，对局部肿瘤进行较好的控制可以明显增加食管癌患者总生存期及改善患者生存质量。
HIF-1主要是由α和β亚基组成，常氧下HIF-1会快速降解，但是当乏氧时HIF-1α的泛素化会急剧减少，与此同时从细胞质转位到细胞核中与HIF-lβ相结合形成二聚体。随后HIF-1二聚体再通过HIF-1α碳末端的入核信号诱导转位到细胞核中，HIF-1二聚体再与乏氧诱导因子的乏氧反应元件(hypoxiaresponse element，HRE)上的HIF-1α结合位点相结合，最终促进乏氧诱导基因的转录从而引起一系列细胞对缺氧状态的反应[4]。此外，在乏氧时，HIF-I通过调节非依赖VEGF的信号传导通路和依赖VEGF的信号传导通路，从而促进肿瘤血管的生成[5]。有关研究表明，HIF-l在人类大多数正常组织中未发现表达，但是却在70％以上的肿瘤组织中发现HIF-1的过表达，而且其过表达与预后密切相关[6]。
该研究结果显示，食管癌组HIF-1过表达率与相应癌旁组织组（距离癌组织5 cm以上）比较有统计学意义；随着食管癌组织病理学逐渐加重，HIF-1过表达率也呈现出逐渐上升的趋势，这提示HIF-1过表达可能参与食管鳞状上皮细胞的癌变过程，并且在食管癌恶性转化过程中起一定作用。该研究结果显示，有淋巴结转移组过表达率高于无淋巴结转移组，高分化组HIF-1过表达率较中低分化组过表达率低，提示HIF-1在食管癌淋巴结转移及恶性程度中起一定作用。食管癌HIF-1表达阳性组及阴性组2年生存率比较有差异，提示HIF-1过表达可能成为食管癌预后评价因子。综合以上结果显示，HIF-1过表达促进肿瘤细胞发生、发展，且提示预后不良。因此针对HIF-1的分子靶向治疗可在一定程度上阻止食管癌侵袭、转移，进而食管癌患者的预后并延长生存期。
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参考文献
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[2] 邹金，李亨芬，邢咏梅，等．不同抗原修复方法对Ki-67蛋白检测结果的影响[Ｊ]．中华实用诊断与治疗杂志，2011，25(7)：664－666．
[3]Matuschek C,Bolke E,Zahra T,et al.Trimodal therapy in squamous cell carcinoma of the esophagus[J].Eur J Med Res,2011,16(10):437-444.
[4]Bracken CP，Whitelaw ML，Peet DJ． ne hypoxia—inducible facters ker transcriptional regulator of hypoxia responsws[Ｊ]．Cell Mol Life sci，2003，60：1376-1393．
[5]朱宏.施瑞华缺氧诱导因子与肿瘤血管生成[J]．国外医学肿瘤学分册，2004，31(8)：591-594．
[6]Harris AL．Hypoxia：a key regulatory factors factor in tumour growth[Ｊ]．Nat Rev Cancer，2002，2：38-47．
（收稿日期：2013-12-25）