陈玉婷1 曹永芬2
1 贵阳中医学院 贵州省贵阳市 550025 2 贵阳中医学院第二附属附院 贵州省贵阳市 550000
【摘 要】目的：分析NF-kB 信号在类风湿关节炎临床治疗指导评价中应用的意义。方法：选取60 只雄性SD 大鼠，0.1ml 福氏完全佐剂注入右后足足垫皮内，随机平均分为对照组与治疗1 组、治疗2 组，空白组不予治疗，治疗1 组艾灸治疗，治疗2 组艾灸治疗同时摘除肾上腺，对比3 组NF-kB p65 的活性。结果：对照组、治疗1 组、治疗2 组最终NF-kBp65 吸光度值分别为0.64±0.02、0.37±0.04、0.63±0.01，治疗1 组NF-kB p65 吸光度值明显优于对照组（P<0.05），治疗2 组与对照组NF-kB p65 吸光度值无明显差异（P>0.05）。结论：艾灸疗法可有效抑制NF-kB 炎性信号通路、抗炎，但需要在HPAA 完整性前提下才能实现。
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关键词 NF-kB 信号；类风湿关节炎；临床应用
类风湿性关节炎（RA）是集骨纤维化、骨质破坏、软骨吸收、慢性炎性反应于一体的慢性自身免疫性疾病，RA 的产生主要因为体内缺乏内源性糖皮质激素[1]。HPAA（下丘脑- 垂体- 肾上腺轴）在治疗中发挥着调节免疫、抑制RA 炎性反应的重要作用。而艾灸被证实是RA 临床的有效治疗方案，本研究分析了艾灸治疗中NF-kB信号特点。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取60 只健康的雄性SD 大鼠，随机平均分为对照组和2 个治疗组。对照组20只，体重（202.1±13.1）g；治疗1 组20 只，体重（199.5±10.4）g；治疗2 组20 只，体重（205.3±13.4）g。3 组健康状况和基础资料无统计学差异，P>0.05。
1.2 方法
首先将0.1ml 福氏完全佐剂注入右后足足垫皮内，对照组不予以治疗。
治疗2 组摘除肾上腺： 腹腔注射50mg/kg 戊巴比妥钠。按麻醉，俯卧，在两侧背部肋缘下1cm×1cm 范围去毛，清洁消毒，将肌肉分离后找准双侧肾上腺，切除并缝合。
2 个治疗组均予艾灸治疗。将大鼠固定于台上后在足三里、肾俞等部位各麦粒灸5 壮（每壮为艾绒5g），左右交替艾灸，1 次/d，1 疗程为6 天，连续治疗3 疗程。
1.3 评价标准
对比3 组NF-kB p65 的活性： 先后以标本固定液、石蜡包埋处理3 组右侧踝关节，制作滑膜组织切片并脱蜡、冲洗、PBS 浸泡，去离子水孵育，山羊血清工作液滴加处理，孵育，辣根酶标记、DAB 显色剂处理，蒸馏水冲洗、复染、水洗、脱水，透明处利后封片。以普通光镜放大200 倍观察，NF-kB p65 阳性表达即可见呈褐色，阳性越明显、染色越深。视野由计算机摄像系统采样、BioMias 对图像中信号特点处理分析，计算阳性染色面积、吸光度数据[2]。
1.4 数据处理
本次数据采用spss16.0 软件对本研究的数据进行统计学的分析，计数资料的对比应用卡方检验，而计量资料的对比应用t检验，P<0.05 时，差异具有统计学意义。
2 结果
对照组、治疗1 组、治疗2 组最终NF-kB p65 吸光度值分别为0.64±0.02、0.37±0.04、0.63±0.01， 治疗1 组NF-kBp65 吸光度值明显优于对照组（P<0.05），治疗2 组与对照组NF-kB p65 吸光度值无明显差异（P>0.05）。见表1。
3 讨论
RA 临床治疗多使用非甾体消炎药、免疫抑制类药物，内源性GC 的肾上腺皮质经典激素类疗法也有理想的抗炎效果。
NF-kB 是RA 进展中滑膜炎性反应重要的炎性细胞信号转导通道，其可通过IKK 的激活，激活IKB 磷酸化修饰，促使p65 与p50 的大量产生，尤其可提升细胞核中上述物质的含量，从而对炎性反应的发生起到调控作用。NF-kB 类蛋白在滑膜细胞核内大量存在，若发生类风湿关节炎，患者患处滑膜内就会有更多的NF-kB 表达现象。本次研究关节炎大鼠模型相关操作中，福氏佐剂造模后会很快发生NF-kB表达现象。GC 的存在会对NF-kB 细胞信号的转录过程产生干扰和抑制，从而达到理想的抗炎效果。而HPAA 的保留是实现GC合理分泌、控制NF-kB转录工作的关键。
本研究分析了艾灸治疗中NF-kB 信号特点在足三里、肾俞等部位各麦粒灸5壮（每壮为艾绒5g），连续治疗3 疗程共18d，最终检测到对照组、治疗1 组、治疗2 组最终NF-kB p65 吸光度值分别为0.64±0.02、0.37±0.04、0.63±0.01， 保留HPAA 且规范艾灸的一组有很好的NF-kBp65 吸光度结果，证实了治疗的有效性。艾灸可改善HPAA 功能，更好地对炎性细胞因子释放产生调控，达到治疗目的。艾灸的治疗效果必须在HPAA 保留的前提下才能得到保证，再次证明了HPAA 功能正常情况下配合艾灸治疗的必要性。
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参考文献
[1] 贾建芳, 岳红, 王宏等. 基于LHS 方法NF-KB 信号转导网络的多参数敏感性分析[J]. 应用基础与工程科学学报,2008,16(4):605-615.