高广印 王 琛 孙守国 黄山青
安徽广印堂中药股份有限公司 安徽省亳州市 236803
【摘 要】目的：采用分光光度法对脑力静颗粒中甘油磷酸钠进行含量测定研究，以更好的对其进行质量控制。方法：采用分光光度法进行分析，检测波长为720nm。结果：该法操作简便，线性关系、精密度、重复性、稳定性、加样回收均良好，结果满意。结论：本方法简便易行，为风痛宁片的质量标准提升提供了方法参考。
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关键词 脑力静颗粒；分光光度法；甘油磷酸钠；含量测定
1 仪器与试剂
（1） 仪器： 电子天平( 梅特勒，AG285)，超声仪（上海声源，SY3200），离心机（上海安亭，TDL-5），马弗炉( 合肥科润机电，XMT 数显)，紫外- 可见分光光度计( 安捷伦- 上分，6010)。（2）试药：磷酸二氢钾( 中检院，批号100745-200401)；水为去离子水；其余试剂均为分析纯。脑力静颗粒由安徽广印堂中药股份有限公司提供。
2 方法与结果
（1） 对照品溶液的制备。精密称取经105℃干燥2h 的磷酸二氢钾对照品136.0mg，置100ml 量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为磷酸二氢钾工作对照品溶液。
（2）供试品溶液制备。取装量差异项下的本品内容物，研细，取2g，精密称定，置25ml 量瓶中，加水适量搅拌超声溶解15 分钟后，加水稀释至刻度，摇匀，离心（3000rpm，10min）。精密量取上清液5ml，置25ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品N 溶液；另精密量取上清液10ml置盛有1g 氧化锌粉末的坩锅中，混匀，水浴蒸干后，置电炉上炭化，600℃炽灼1h，冷却至室温，加水5ml，加盐酸5ml，加热煮沸溶解，转移至50ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品M 溶液。
（3）测定法。分别精密量取磷酸二氢钾对照品溶液及供试品无机磷、总磷溶液各5ml 置25ml 量瓶中， 加钼酸铵[ 称取钼酸铵5g，加5%(g/ml) 硫酸溶液溶解并稀释至100ml]1ml 与0.5% 对苯二酚[ 称取对苯二酚0.5g， 加0.25%(g/ml) 硫酸溶液溶解并稀释至100ml；临用新制]1ml。
再加50% 醋酸钠溶液3ml，用水稀释至刻度，摇匀。另取水5ml 置25ml 量瓶中，同法处理，所得的溶液为空白参比溶液。
参照分光光度法，在720nm 波长处快速测定显色后的对照品溶液、供试品总磷、无机磷溶液的吸光度，计算甘油磷酸钠（C3H7Na2O6P?5.5H2O）含量。
（4）阴性样品干扰试验：按照处方比例组成，配制成不含甘油磷酸钠的阴性样品，精密称取阴性样品适量，用水溶解，超声15min，按照含量测定方法，分别配制不同样品（无机磷）、（总磷），另同法配制脑力静颗粒的供试样品（无机磷）、（总磷）]，依法测定其吸光度。试验结果：阴性样品中总磷与无机磷吸光度基本一致，表明阴性中几乎不含有机磷，即阴性不干扰样品测定；其数值同时与成品供试品中无机磷相近，表明成品制剂中无机磷主要来源于阴性样品中原辅料，也表明原料药甘油磷酸钠（50%）中几乎不含无机磷，因此，通过制剂中总磷含量扣除无机磷即可折算出甘油磷酸钠（有机磷）的含量。
（5）线性关系考察：精密称取干燥2h 的基准磷酸二氢钾136.42mg 置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为磷酸二氢钾储备溶液。精密量取储备液2.0，3.0，4.0，5.0，6.0，7.0， 分别置50ml 量瓶中，加水稀释至刻度。按方法试验，以磷的浓度(C，ug/ml) 为横坐标，吸光度(A) 为纵坐标，进行线性回归，得回归方程如表1。
结果表明： 磷浓度在12.43~43.51ug/ml 的范围之间， 吸光度（A） 与浓度（C） 线性关系良好， 回归方程为A=0.0219C+0.0125，r=0.9996。
（6）含量测定及限度制定：取不同规模试制的脑力静颗粒，依法制备供试品溶液并测定其甘油磷酸钠的含量，结果表明：本品不同规模的样品中每袋含甘油磷酸钠(C3H7Na2O6P?5.5H2O) 含量为均在80mg 以上。
限度制定：建议拟定将本品中甘油磷酸钠(C3H7Na2O6P?5.5H2O) 的含量限度定为：每袋不少于80mg。
3 讨论
（1）检测波长的选择：分别取上述磷酸二氢钾对照品溶液及供试品M、N 溶液，依法显色，照分光光度法，在400~900nm范围处进行波长扫描，结果在720nm 左右处各供试液均有最大吸收峰，同时参照中国药典第二部中甘油磷酸钠注射液中“磷”的测定及相关文献，最终确定本试验的检测波长为720nm。（2）不同超声时间的考察：按供试品溶液制备方法测定，得甘油磷酸钠的吸光度。试验结果：随着超声时间增加至15min 以上，吸光度没有明显提高，考虑长时间超声会使溶液发热，选择15 分钟较合适。
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参考文献
[1] 卫生部药品标准中药成方制剂[S]. 第十九册,1998,162.
[2] 中华人民共和国国家药典委员会. 中国药典[S]. 一部. 北京: 中国医药科技出版社,2010,376-376.