曹 康
苏州市工业园区娄葑医院病理科江苏省苏州市215000
【摘 要】目的：探讨快速石蜡切片技术在病理诊断中的应用效果。方法：我院选取了2013年1月至2014年12月期间的134例进行快速石蜡切片的病例作为研究对象，选择同期3170例常规病理切片病例进行对比。使用快速工序和步骤，其中有取材、脱水、浸蜡、切片、封固、染色等。把石蜡常规切片与快速切片进行对比，分析制作时间、诊断准确率。结果：标本固定时间、脱水时间依次缩短，快速石蜡切片技术与常规切片技术相比，每一个步骤时间都缩短了4-10min。结论：快速石蜡切片技术在制作完成后，细胞的形态、细胞核、细胞质和普通切片没有明显差距，但是制作时间明显缩短，应临床推广。
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关键词 快速石蜡切片技术；病理诊断；应用探讨
日常病理诊断过程中，对病理切片技术的要求越来越高，但是其病理切片制作的时间受到制约。当前我国对病理快速诊断的方式有传统加温石蜡或者冷冻技术，但是经研究发现，病理快速诊断时使用冷冻切片不容易连续切片，不能制较薄切片等现象，传统加温石蜡技术在制作过程中比较复杂，容易导致组织硬变以及收缩[1]。
在进行快速病理诊断时，制片速度和制片质量非常关键。为研究快速石蜡切片技术在病理诊断中的应用效果，我院选取了2013年1月至2014年12月期间的134例进行快速石蜡切片的病例作为研究对象，选择同期3170例常规病理切片的病例进行对比。现将结果报告如下：
1资料与方法
1.1一般资料
我院选取了2013年1月至2014年12月期间的134例快速石蜡切片病例作为研究对象，选择同期的3170例常规病理切片病例进行对比。134例快速石蜡切片中男性74例，女性60例，年龄在34-75岁之间，平均年龄为（43.24±10.38）岁，其中来自内科11例、妇科21例、外科手术58例、窥镜室44例。3170例常规病理中男性1568例，女性1602例，年龄在30-78岁之间，平均年龄为（43.24±10.43）岁。
1.2试剂选择
1.2.1试剂
本次研究所用的固定剂、脱水剂、浸蜡剂都属于国产试剂。其中固定剂包括：80ml纯度为90%的酒精、5ml冰乙酸、15ml纯度为40%的福尔马林，以上物品混合均匀；脱水剂，透明剂均为丙酮；浸蜡剂：选取石蜡、硬脂酸、软蜡均匀混合。
同时使用微波炉对固定剂、脱水剂以及浸蜡剂进行加热，将温度合理控制，其温度保持在50°左右。
1.2.2研究仪器选择
本次研究使用的仪器为日产樱花牌全自动组织脱水机，型号为WD900G[，以及格兰仕750w微波炉。
1.3操作方法
（1）取材、脱水、浸蜡使用超声波快速处理仪器把开机预热到70℃，使用手术刀将组织处理为1.2mm的薄片，把甲醛固定液放入，等待1min后将组织取出，使用清水冲洗10s，经组织放在滤纸上晾干。
随后放入纯丙酮中进行处理，直到组织上浮。将硬脂酸、石蜡放入，使用镊子对组织进行倾轧，直到没有气泡出现。
（2）切片、染色对组织进行普通包埋以及切片，切片厚度控制在3.5μm。把切片贴在烤片机中加热30s，注意烤片的温度要控制在80℃以内[3]。然后进行脱蜡染色，时间为4min，染色完成后使用中性树胶完成封固步骤。
（3）对3170例病理进行常规石蜡切片。
2结果
切片组织制作完成之后，我们将快速切片与常规切片进行了对比，观察快速诊断的质量以及确诊率，经观察发现：快速切片组织下的组织结构清楚情况明显优于对照组，镜下可看到细胞的完整形态，胞核胞质完整、清晰，与常规切面下的组织无差异并且制作时间明显短于常规切片的制作时间，具体内容见表1。
3讨论
从上述结果可知，快速石蜡切片操作简单，并且实验期间所用的仪器价格适中，实验操作不受地域、气候以及环境的影响，在制作中有时间优势，但是快速石蜡切片技术在制作的过程中要注意以下内容：
3.1脱水机温度
进行切片制作时应该把温度保证在72℃以内，如无法准确掌握可将温度适当调低。
3.2材料
取材料时应该密切观察组织病变处的边缘组织，周围组织以及组织之间的交界处，同时组织块要求小、适中；实验过程中组织的厚度会对脱水效果和时间造成直接影响，所以要将组织厚度控制在1mm内，最厚不得大于1.5mm[4]。
3.3标本制作
一般情况下制作新鲜标本时厚度无法准确确定，所以可以试验将组织厚度固定修整后进行制作。
3.4处理液
制作过程中的处理液（石蜡、丙酮、AF液）等要将标准体积超出12倍以上。脱水时要等待至全干，以眼睛可观察到组织灰白色为准。制作中如果有富含脂肪、纤维的组织要将固定脱水的时间固定延长。
快速石蜡切片进行制作时必须要有准确的取材，必须取典型病变部位中，快速石蜡结果要与临床思路相互联系，在制作完成之后对结论要充分验证，镜下的石蜡切片技术应该把制作中组织的假象排除，并且在制作过程中需及时排除癌细胞退变以及衰老现象发生。
石蜡快速切片技术对实验室的条件和设备要求不高，技术成本低廉，并且大大提高出片时间[5]。同时因为快速石蜡切片的取材、脱水、浸蜡、固定以及包埋等操作步骤均在有自动换气系统中的操作台中进行，因此在制作的过程中还防止了污染现象发生。
影响快速石蜡切片技术制片效果的原因有以下方面：加热煮沸时间，加热时间短会影响脱水效果，导致切片困难。加热时间长会导致组织收缩、变脆，甚至会出现过度脱水现象[6]。
本次研究发现，快速切片组织下的组织结构清楚情况明显优于对照组，镜下可看到细胞的完整形态，胞核胞质完整、清晰，与常规切面下的组织无差异并且制作时间明显短于常规切片的制作时间。
综上所述，快速石蜡切片技术在制作完成后细胞的形态、细胞核、细胞质和普通切片没有明显差距，可将制作时间明显缩短，应临床推广。
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参考文献
[1]熊正文,胡海霞,黄勇,等.光波-微波快速石蜡切片技术在肺穿刺活检中的应用[J].中国职业医学,2013,03（07）:230-231.
[2]彭红飞,梁春霞.超声波快速石蜡切片在术中乳腺肿瘤病理诊断中的应用[J].当代医学,2014,02（03）:105-106.
[3]仲铨维,吕芳.快速石蜡痰切片技术在痰脱落细胞学检查中应用[J].齐鲁医学杂志,2014,04（07）:351-352.
[4]张玉,赵雪艳,刘光英,等.细胞印片与快速石蜡切片相结合在术中病理诊断中的应用[J].延安大学学报(医学科学版),2013,02（01）:45.
[5]熊正文,曲延静,黄勇,等.光波-微波组合技术在肠道标本石蜡切片与免疫组化染色中的应用[J].华北国防医药,2014,05（03）:312-314+381.
[6]邱瑞成,唐世洪,杨天真,等.超声波快速石蜡细胞块切片技术在细针穿刺活检中的应用[J].临床与实验病理学杂志,2014,04（06）:487-488.