潘玉香
山东省商河县人民医院妇产科，山东济南 251600
[摘要] 目的 探讨子宫内膜异位症患者血清、腹腔液、在位/异位内膜组织中RANTES的表达及意义，为临床上子宫内膜异位症的治疗提供依据。方法 以本院2011年10月—2013年10月接收的行腹腔镜手术、经腹腔镜及病理确诊为子宫内膜异位症的34例患者为观察组；同期因其他原因行腹腔镜手术的、非子宫内膜异位症且盆腔结构正常的40例患者为对照组。采用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测两组患者血清、腹腔液、在位/异位内膜组织中RANTES， 对比观察组、对照组间各项结果，同时对观察组不同分期患者之间血清、腹腔液、在位/异位内膜组织中RANTES的表达进行对比分析。结果 观察组血清、腹腔液中RANTES的表达量分别为671.3±125.7ρ/(ng·L-1)、20.4±2.9ρ/(ng·L-1)，对照组血清、腹腔液中RANTES的表达量分别为557.6±102.9ρ/(ng·L-1)、11.6±3.2ρ/(ng·L-1)，观察组显著高于对照组，差异均具有统计学意义（t1=37.84，P1=0.000；t2=26.13，P2=0.000），且不同分期子宫内膜异位症患者的RANTES的表达量差异具有统计学意义（t1=29.57，P1=0.000；t2=7.64，P2=0.011），其中Ⅲ、Ⅳ期显著高于Ⅰ、Ⅱ期（P<0.05）。正常内膜、在位内膜、异位内膜中RANTES的表达水平比较差异具有统计学意义（t=11.25，P=0.003），其中异位内膜、在位内膜显著高于正常内膜（P<0.05）；轻度(Ⅰ~Ⅱ)子宫内膜异位症患者在位内膜、异位内膜中RANTES的表达水平显著低于重度患者(Ⅲ~Ⅳ)，差异均具有统计学意义（t1=8.65，P1=0.009；t2=9.22，P2=0.007）。结论 子宫内膜异位症患者血清、腹腔液、在位/异位内膜中RANTES的表达量显著高于非子宫内膜异位症患者，且其表达量与临床分期有关，表示RANTES可能参与子宫内膜异位症的发生和发展。
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关键词 ] 子宫内膜异位症；RANTES；血清；腹腔液；在位内膜；异位内膜
[中图分类号] R711.71 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2014）07（a）-0094-02
子宫内膜异位症是临床上常见的妇科疾病，由于其病变累及广泛，可引起盆腔粘连，使输卵管的受孕功能遭到干扰，导致不孕，并且研究显示[1-2]，其在育龄妇女中的患病率可高达15%~20%，使其成为国内外基础及临床研究的热点之一。近年来，随着对其致病机制基础研究的不断深人发现许多细胞因子在Ems的发生、发展中可能起着重要作用，而RANTES作为人单核巨噬细胞和淋巴细胞的选择性趋化因子，研究显示[3-4]，其能够募集巨噬细胞至Ems病灶部位，但是临床上对于RANTES与Ems局部免疫异常的关系鲜有报道。本文以34例子宫内膜异位症的34例患者和40例非子宫内膜异位症且盆腔结构正常的患者为研究对象，探讨子宫内膜异位症患者血清、腹腔液、在位/异位内膜组织中RANTES的表达及意义，为临床上子宫内膜异位症的治疗提供依据，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择本院2011年10月—2013年10月接收的行腹腔镜手术、经腹腔镜及病理确诊为子宫内膜异位症的34例患者为观察组；年龄24～47岁，平均年龄(32.3±5.2)岁。根据美国生殖协会(AFS) 修订的分期标准(rASRM)进行分期，其中Ⅰ期9例；Ⅱ期8例；Ⅲ期11 例；Ⅳ期6例。月经卵泡期19例；月经黄体期15例。同期因其他原因行腹腔镜手术的、非子宫内膜异位症且盆腔结构正常的40例患者为对照组，年龄25～46岁，平均年龄(32.9±4.8)岁。月经卵泡期23例；月经黄体期17例。两组均排除内分泌和感染性疾病、术前有激素治疗史的患者，且两组患者在年龄、月经分期等一般资料方面差异无统计学意义（P<0.05），具有可比性。
1.2方法
采集静脉血检测血清RANTES，腹腔积液于腹腔镜术中从患者腹腔内抽取，通过手术获取患者在位/异位内膜组织。
1.2.1 标本采集 ①血液：所有患者均于手术当天采取肘静脉血2 mL；注入试管待凝固后，4℃3000r/min离心；取血清，-80℃冰箱存储待测。
②腹腔液：观察组患者在月经干净后3~7d内接受腹腔镜手术；对照组在非月经期内接受腹腔镜手术。术中收集两组患者腹腔液3~5 mL；置于无菌离心管中；4℃3000r/min离心取上清液；-80℃冰箱存储待测。
③异位内膜：手术室严格无菌操作下取2cm*3cm大小的卵巢子宫内膜异位囊肿囊壁、腹膜内异症病灶或深部病变结节等异位内膜；置入PBS液内反复洗涤后，置于-170℃液氮罐中保存速冷；用组织匀浆液以2500r/min离心15 min，取上清液；-80℃冰箱存储待测。
④在位、正常内膜：手术前诊刮术或全子宫切除获取在位/正常内膜；置入PBS液内反复洗涤后，置于-170℃液氮罐中保存速冷；用组织匀浆液以2500r/min离心15 min，取上清液；-80℃冰箱存储待测。
1.2.2 检测 采用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测两组患者以及观察组不同分期患者之间血清、腹腔液、在位/异位内膜组织中RANTES的表达。酶标仪为深圳霄杜生命科学有效公司RT-6100酶标仪，试剂盒为上海达为科生物科技有限公司酶联免疫试剂盒ELISA Kit（各项操作严格按试剂盒说明书进行，批内变异<6.0%）。
1.3 统计学方法
所有数据均以spss 17.0进行分析；计数资料以率或构成比表示，行Fisher检验；计量资料以表示，行t检验；以P<0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组患者血清、腹腔液中RANTES的表达水平比较
观察组血清RANTES显著高于对照组(t1=37.84，P1=0.000)，观察组腹腔液中RANTES的表达量显著高于对照组，差异具有统计学意义（t2=26.13，P2=0.000），且Ⅲ、Ⅳ期分期子宫内膜异位症患者的血清、腹腔液RANTES的表达量均显著高于Ⅰ、Ⅱ期，差异均具有统计学意义（P<0.05）。见表1。
2.2 正常内膜、在位内膜、异位内膜中RANTES的表达水平比较
正常内膜、在位内膜、异位内膜中RANTES的表达水平比较差异具有统计学意义（t=11.25，P=0.003），其中异位内膜、在位内膜显著高于正常内膜（P<0.05）。轻度(Ⅰ~Ⅱ)子宫内膜异位症患者在位内膜、异位内膜中RANTES的表达水平显著低于重度患者(Ⅲ~Ⅳ)，差异均具有统计学意义（t1=8.65，P1=0.009；t2=9.22，P2=0.007）。见表2。
3讨论
本研究结果表明，子宫内膜异位症患者血清、腹腔液中RANTES的表达量显著高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05），提示RANTES在全身及局部都参与了Ems的发生，且不同分期子宫内膜异位症患者的RANTES的表达量差异具有统计学意义（P<0.05），其中Ⅲ、Ⅳ期显著高于Ⅰ、Ⅱ期（P<0.05）说明RANTES的表达促进了Ems的发生，考虑是由于其促进中性粒细胞附壁及促进其从毛细血管和微静脉中渗出，并且活化并趋化中性粒细胞到达病灶，形成子宫内膜异位症患者腹腔微环境中的细胞因子，构成多重调节作用和免疫叠加作用，形成复杂的细胞因子级联效应。研究中还发现，正常内膜、在位内膜、异位内膜中RANTES的表达水平比较差异具有统计学意义（P<0.05），其中异位内膜、在位内膜显著高于正常内膜（P<0.05），从RANTES 表达这一角度佐证了具有内在差异的在位内膜是子宫内膜异位症形成中的决定因素，为治疗子宫内膜异位症开辟一条新途径[5-6]。另外，轻度(Ⅰ~Ⅱ)子宫内膜异位症患者在位内膜、异位内膜中RANTES的表达水平显著低于重度患者(Ⅲ~Ⅳ)，差异均具有统计学意义（P<0.05），进一步证实了RANTES在EMs的发病环节中可能具有重要意义，考虑是由于局部病灶RANTES的增多可募集大量的炎性细胞进入病灶，促进其降解细胞外基质，并直接促进异位内膜间质细胞的增生，有利于异位内膜的维持和进一步发展。
综上所述，子宫内膜异位症患者血清、腹腔液、异位内膜、在位内膜中RANTES的表达量显著高于非子宫内膜异位症患者，且其表达量与临床分期有关，表示RANTES可能参与子宫内膜异位症的发生和发展。
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参考文献]
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[2] Hornung D, Ryan II, Chao VA, et al.Immunolocalization and regulation of the chemokine Rantes in human endometrial and endometriosis tissues and cells[J]. J Clin Endocrinol Metab, 2007，82(5):1621-1628.
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[4] 张烜,吴静.子宫内膜异位症在位、异位内膜COX-2表达及腹腔液PGE2 含量的研究[J] .海南医学, 2010,21(5):1-4.
[5] 范小斌,曹引丽,蔺小贤,等.RANTES在子宫内膜异位症在位内膜及异位内膜的表达及其意义[J].实用妇产科杂志, 2012,28(12):1035-1038.
[6] 姜立杰,祁美霞,丁玲玲.趋化因子RANTES和EOTAXIN与子宫内膜异位症发病关系的研究[J].中国煤炭工业医学杂志, 2008,11(8):1148-1149.
（收稿日期：2014-04-10）