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酶联免疫吸附试验检测艾滋病病毒抗体的失控原因分析

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  • 更新时间2021-09-30
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摘    要:目的 评价酶联免疫吸附试验对艾滋病病毒抗体检测失控的原因,以期待为临床检验工作提供科学依据。方法 选择2018年5月至2019年10月来我中心进行艾滋病病毒抗体筛查的34例疑似艾滋病患者,对所有调查对象选择采用酶联免疫吸附试验进行检测,检验过程中对受试者进行静脉血采集,常规进行艾滋病病毒抗体的检查,并将蛋白印迹试验作为参照,对诊断结果进行统计分析,并且研究酶联免疫吸附试验检测艾滋病病毒抗体失控的原因。结果 蛋白印记试验检验33例被确诊为艾滋病患者,占97.06%;对所有患者应用酶联免疫吸附试验进行艾滋病病毒抗体检测,诊断为艾滋病患者30例,诊断的符合率为90.91%,敏感度为96.67%,特异度为75.00%,准确度为94.12%;对所有调查对象进行追溯分析,在误诊的3例患者当中,存在标本污染、溶血标本、血液标本处理不当各1例,标本处理不当的主要原因为浓度较高的非特异性免疫球蛋白影响而出现假阳性,还有1例患者标本当中含有补体险些导致漏诊出现,但经过仔细分析对比而避免了相关状况的发生,也提示临床应对此状况予以重视。结论 临床对艾滋病病毒抗体通过酶联吸附试验进行检验能够具有较高的诊断效率,而导致检验失控的原因来自于多个方面,综合做好各个方面的质控工作能有效确保酶联免疫吸附试验对艾滋病诊断的效率提高。
关键词:酶联免疫吸附试验 艾滋病病毒抗体 失控原因

艾滋病是临床上的一种传染性较强的免疫缺陷性病症,这种病症会通过母婴传播、血液传播、性途径接触传播等方式导致人体感染艾滋病病毒[1]。最近这几年我国艾滋病的发生率在逐年的提高,也使得艾滋病成为对人类生命健康产生威胁的一个重大病症,及时的选择安全有效的方法进行临床筛查对控制艾滋病的蔓延具有重要的价值[2]。酶联免疫吸附试验主要是一种固相免疫检验方法,在临床应用的过程中操作简单快捷,而且具有较强的特异性和灵敏性,能够多次重复操作,也是对患者确认是否感染艾滋病的一个有效途径。临床实践研究认为[3],在进行操作的过程中会因为技术因素、外界环境因素、标本因素等多方的影响,导致存在一定程度的假阳性和假阴性结果,所以会产生艾滋病病毒检验抗体失控。本文主要基于此进行调查,同时将主要研究情况报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料
本文调查时间选择2018年5月至2019年10月,选择的调查对象为在此期间来我中心进行艾滋病病毒抗体筛查的34例疑似艾滋病患者,所有患者当中存在男性11例,女性23例,患者年龄最大为48岁,年龄最小为26岁,平均年龄为(35.15±5.46)岁。所有调查对象签署知情同意书,临床资料经伦理委员会批准和认可。
1.2 样本的采集和处理
对所有调查对象均抽取清晨的新鲜空腹静脉血,在采集血液的过程中要保证无菌操作的原则,并且避免剧烈的震荡试管而导致的不良状况出现。当标本采集成功以后需要在常温的环境之下放置1~2 h,在血液凝固之后进行3000转每分钟的离心处理,处理时间大约为15 min。对所有采集的标本需要贴上标签,标注患者的相关信息等,并且尽快的对患者的标本进行检验。如果在5 d内进行检验,那么需要将标本保存在2~8℃的环境当中,如果一周以后才进行检验,则需要将标本保存在零下20℃的环境当中[4]。
1.3 关于标本试剂的选择
标本试剂主要应用珠海丽珠试剂股份有限公司的相关产品,确保所选择的试剂经过国家食品药品监督管理局的认可,并且经过注册,试剂质量检验合格,并控制在有效期当中,检验的过程中严格的根据试剂盒的说明书进行操作。本文应用的全自动酶标仪来自北京普朗公司,型号为DM9602,洗板机同样来自于北京普朗,型号为9620。
1.4 阳性结果判定标准
通过应用450 nm波长对各个孔值进行测定,并且对样本的吸光度进行确定,以样本吸光度/阳性判断值不足1表示为阴性,反之则为阳性[5]。
1.5 统计学方法
本研究所产生的数据采用spss25.0进行统计分析与处理,且本文所有数据均符合正态分布,计数资料通过组间行χ2检验后用[n(%)]表示,P<0.05表示差异有显著性。

2 结果

蛋白印记试验检验33例被确诊为艾滋病患者,占97.06%;对所有患者应用酶联免疫吸附试验进行艾滋病病毒抗体检测,诊断为艾滋病患者30例,诊断的符合率为90.91%,敏感度为96.67%,特异度为75.00%,准确度为94.12%;对所有调查对象进行追溯分析,在误诊的3例患者当中,存在标本污染、溶血标本、血液标本处理不当各1例,标本处理不当的主要原因为浓度较高的非特异性免疫球蛋白影响而出现假阳性,还有1例患者标本当中含有补体险些导致漏诊出现,但经过仔细分析对比避免了相关状况的发生,也提示临床应对此状况予以重视。见表1。
表1 酶联免疫吸附试验与蛋白印记试验结果比较

3 讨论

酶联免疫吸附检验方法检验艾滋病病毒抗体失控的原因主要包括标本、检验试剂和操作人员技术等各个因素。针对于此,临床需要采取有效的措施避免相关风险产生的影响[6]。
在标本采集时要严格的根据无菌操作的原则进行落实,采集以后避免存在过度的震荡,标本采集以后要放置在常温环境之下1~2 h,在血块收缩或血液凝固以后进行离心处理。尽量对标本进行立即检测,如果不能立即检测,5 d之内检测的标本要放置在2~8℃的环境当中,而1周以后检测的标本需要放置在零下20℃的环境中[7]。在标本中还要加入抗凝物质,尽量不应用酶抑制剂,这样能够防止对酶联免疫吸附试剂当中酶的活性产生影响[8]。
艾滋病抗体检验的所有试剂盒都应该确保经过国家的注册和认证批准,而且保证检验合格没有过期的情况。在设计和选择的时候要严格的根据检验报告对监制评估数据进行选择,应用灵敏度特异性较高的试剂盒[9]。还要对相关的检验做好预处理,每次应用试剂盒以前需要在室温环境之下放置30 min以上,并且确保试剂的温度和室温相类似,以避免对抗体结合和反应速度产生影响,而导致检验结果出现偏差。同时也要注意避免应用不同厂家和不同批号的试剂[10]。
综上所述,临床对艾滋病病毒抗体通过酶联吸附试验进行检验能够具有较高的诊断效率,而导致检验失控的原因来自于多个方面,综合做好各个方面的质控工作,能有效确保酶联免疫吸附试验对艾滋病诊断的效率提高。

参考文献
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[2]焦妍妍,武会锋,宋春仙.2014-2018年郑州某院就诊患者梅毒与HIV抗体血清学检测分析[J].河南预防医学杂志,2021,32(4):288-290.
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[7]于丽莎.电化学发光免疫法与酶联免疫吸附法检测艾滋病病毒抗体的价值[J].中国误诊学杂志,2019,14(11):506-508.
[8]董宪春,扎丽帕·热合曼.酶联免疫吸附试验筛查HIV抗体在艾滋病临床诊断中的意义[J].临床检验杂志(电子版),2019,8(2):45-46.
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[10]刘洋,杨慧娣,蒋苏,等.胶体层析法与酶联免疫吸附试验在急诊艾滋病病毒(HIV)抗体初次筛查中的比较分析[J].中国性科学,2019,28(1):118-121.