卢宇明1 李 欢2 刘 慧1 鄢莎莎1 陈思锦1
1.遵义医学院医学检验系，贵州遵义 200032；2.川北医学院医学检验系，四川南充 637007
[摘要] 目的 探讨呼吸道病原体九联检在小儿呼吸道感染中的临床应用价值。方法 对2012年3月—2013年4月期间在该院住院的呼吸道感染的患儿(共104例)采用九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测试剂（间接免疫荧光法）同时检测九项病原体的IgM抗体。 结果 在小儿呼吸道感染患者中，九种病原体检出的阳性率为57.69%，其中主要以肺炎支原体最为常见，占阳性例数的56.7%，其次为腺病毒40%、嗜肺军团菌23.3%；混合感染占感染比例的33.3%。 结论 呼吸道病原体九联检在小儿呼吸道感染检测中检出阳性率高，检测的病原体种类多，发现病原体时间早，对临床的及时诊断、治疗及用药有十分重要的意义。
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关键词 九联检；小儿呼吸道感染；IgM抗体；呼吸道病原体
[中图分类号] R725.6 [文献标识码] A [文章编号] 1674-074２（２０１5）01（b）－０171-02
呼吸道感染是儿科的常见病、多发病，发病率在我国小儿各类疾病中占首位，其病原体包括病毒、细菌、支原体、衣原体等，常见的有：呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）、副流感病毒（HPIVs）、肺炎支原体（MP）、嗜肺军团菌（LP）。据统计，在住院患儿中，上下呼吸道感染占60%以上，是我国5岁以下儿童第一位的死亡原因[1]。为了降低小儿呼吸道感染的死亡率，保护小儿生命健康，对于病原体的检测尤为重要。常用的方法有：病原体的分离培养及组织细胞培养法、血清学、直接检测法(包括电镜法)、间接和直接免疫荧光抗体法(IFA／DFA)、酶免疫测定(EIA)、核酸扩增法(PCR)、碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶桥联酶标(AP-PAAP)法等[2]；但由于小儿的特殊性，可靠的炎性分泌物难以获得，而痰液和咽部分泌物检测易引起口咽部污染，再加上抗生素的广泛应用，血培养阳性率较低，肺炎细菌病原学检测困难，相对的小儿血清样本容易获得，检测相关抗体较为方便，一份标本就可同时检测多种病原体，且特异性高，而且在机体抗感染中，IgM抗体是最早出现的抗体，血清中检出IgM，常提示新近发生感染，可用于感染的早期诊断[3]，为治疗赢得时间。因此该次实验选取2012年3月—2014年4月在该院就诊的104例呼吸道感染的患儿，采用间接免疫荧光法，通过呼吸道病原体九联检，检测呼吸道感染患儿血清中的肺炎支原体（MP）、肺炎衣原体（CP）、呼吸道合胞病毒(RSV)、副流感病毒（HPIVs）ⅠⅡⅢ型、嗜肺军团菌(LP)血清1型、腺病毒(ADV)、甲型流感病毒（Influenza A virus）、乙型流感病毒（Influenza B virus）、Q热立克次体（CB）九类常见病原体的IgM抗体，以探讨该方法在小儿呼吸道感染中的临床应用，为临床用药及治疗提供可靠依据，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
该院住院的呼吸道感染的0~6岁患儿，平均（1.6±0.3）岁，共计104例，其中男74例，女30例。无菌采集患有呼吸道感染的住院患儿的静脉血数毫升，离心分离血清，于采集当天由专人完成检测。
1.2 方法
九联检检测 采用间接免疫荧光法（IFA），基于待测样本中的特异性抗体与吸附在载玻片上的特定抗原反应，未与抗原结合的免疫球蛋白在洗涤步骤中除去，在接下来的步骤中，抗原-抗体复合物与荧光标记的抗人球蛋白反应，通过荧光显微镜即可观察结果。质量控制：每一次试验设立阴性和阳性对照，严格按照九联检试剂说明规范操作，以保证结果的准确性和有效性。试剂盒名称：九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测试剂盒（PNEUMOSLIDE IgM）；产品标准编号：YZB/SPA 5210-2009。
1.3 统计方法
数据统计学分析均采用spss19.00软件进行处理，同组数据以阳性率表示，不同组间样本阳性率比较采用χ2检验。
2 结果
104例患儿中，检出阳性例数60例，阳性率57.69%；其中男性74例，阳性42例，阳性率56.76%；女性30例，阳性18例，阳性率60.00%。男性组与女性组间阳性率比较差异无统计学意义（χ2=0.09，P>0.05）,性别间差异无统计学意义。见表1。
在所检测的九种病原体中以肺炎支原体阳性率最高，占阳性例数的56.7%；其次是腺病毒，占阳性例数的40%；排在第三位的是嗜肺军团菌，占阳性例数的23.3%；第四位的是乙型流感病毒，占阳性例数的15.0%；第五位的是呼吸道合胞病毒，占阳性例数的10.0%；以上五种病原体占总阳性例数的94.6%，为呼吸道常见病原体。见表2。
在60例检测出阳性的患儿中，有20例为混合型感染，比例为33.3%，其中以嗜肺军团菌+肺炎支原体+腺病毒、嗜肺军团菌+肺炎支原体、支原体+腺病毒三种类型最常见，分别为5例（23.8%）、5例（23.8%）、3例（14.3%）。肺炎支原体合并其它病原体感染合计18例，占混合感染的90.0%。见表3。
3 讨论
呼吸道感染的发病率一直位居小儿各类疾病的首位，对它的早期诊断对于临床治疗及用药有十分积极的意义。近年来，由于抗生素的广泛应用、病原体的变异及流行病学的改变等多种因素的影响，各种病原体在小儿呼吸道感染中的比例均有所变化，为临床准确用药、对症治疗造成了一定困难；因此，我们针对各种病原体感染后引起血清抗体的改变，并结合IgM抗体的特点选择了九联检这种试剂，仅需一份血清即可对呼吸道感染中的九种病原体进行检测，通过检测患儿的血清，探讨该方法在其中的临床应用价值。结果表明，在小儿呼吸道感染患者中，九种病原体检出的阳性率达57.69%，占呼吸道感染病原体的一半以上，且检测的是机体抗感染中最早出现的IgM抗体，为临床快速准确地确定呼吸道感染的病因以及及时用药治疗有十分重要的意义。
在所检测的九项病原体中，以肺炎支原体最为常见，占阳性例数的56.7%，较董玉琳报道的21.98%高[4]，而比较接近国外文献报道的50%，是小儿最易感染的呼吸道病原体，主要引起小儿上呼吸道感染和肺炎；其次是腺病毒，占阳性例数的40.0%，能引起上呼吸道疾病，常伴随有急骤发热和轻度呼吸道感染，在所检测的腺病毒感染患儿中有22.7%出现不同程度的呼吸困难；第三位的是嗜肺军团菌，占阳性例数的23.3%；其后依次是乙型流感病毒15%，呼吸道合胞病毒10.0%，肺炎衣原体和甲型流感病毒3.3%，副流感病毒0%。该次实验中未发现副流感病毒，可能与该病原体感染的患者数目较少有关。在该次实验60例病原体检出阳性患儿中，有20例属于混合型感染，占感染比例的33.3% ，混合感染的比例较高，主要以嗜肺军团菌+肺炎支原体+腺病毒、嗜肺军团菌+肺炎支原体、肺炎支原体+腺病毒三种类型最常见，分别为5例（23.8%）、5例（23.8%）、3例（14.3%），合计占混合感染的65.0%，提示临床医生在治疗呼吸道感染的患儿时注意混合感染的情况，避免遗漏病因，彻底治疗。
由于该次实验的呼吸道感染的患儿例数偏少，并不能精确反应小儿呼吸道感染的情况，故仅提供参考，有待进一步探讨。
4 结论
呼吸道病原体IgM九联检在小儿呼吸道感染检测中检出阳性率高，检测的病原体种类多，发现病原体时间早，对临床的及时诊断、治疗及用药有十分重要的意义。
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（收稿日期：2014-10-5）