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S100A4及CEACAM-1蛋白与甲状腺乳头状癌淋巴结转移的相关性分析

  • 投稿叶洛
  • 更新时间2015-09-16
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孙永敏

郑州大学基础医学院(核医学科),河南郑州 450032

[摘要] 目的 对S100A4及CEACAM-1蛋白与甲状腺乳头状癌淋巴结转移的相关性予以探讨。方法 收集该院2013年3月—2013年10月收治的甲状腺乳头状癌淋巴结转移患者102例,对其相关的临床病理因素进行简单分析,并应用免疫组织化学Histofine Simple Stain MAX及EnVision两步法对癌组织中的p27kip1、cyclin D1、CEACAM-1、S100A4蛋白的表达予以检测,应用单因素及多因素分析CEACAM-1、S100A4蛋白与甲状腺乳头状癌淋巴结转移的相关性进行分析。结果 CEACAM-1、S100A4蛋白在甲状腺乳头状癌标本中的检测阳性率分别为51.0%、79.4%,通过实施单因素分析,发现年龄为45岁的患者、肿物直径为1cm的淋巴结的CEACAM-1的阴性表达与S100A4的阳性表达与甲状腺乳头状癌淋巴结转移相关,p27kip1及cyclinD1的阳性表达、侵及甲状腺包膜外、多灶、伴发桥本甲状腺炎、组织学亚型、肿物包膜完整、纤维化、性别等与淋巴结转移无关,通过进一步的多因素研究发现,年龄为45岁的患者、肿物直径为1cm的淋巴结的CEACAM-1的阴性表达与S100A4的阳性表达是甲状腺乳头状癌淋巴结转移的独立性危险因素。结论 CEACAM-1的阴性表达及S100A4的阳性表达与甲状腺乳头状癌淋巴结的转移相关,可以将其作为甲状腺乳头状癌淋巴结转移的预测因素。

[教育期刊网 http://www.jyqkw.com
关键词 ] S100A4蛋白;CEACAM-1蛋白;甲状腺乳头状癌淋巴结;转移相关性

[中图分类号] R73   [文献标识码] A   [文章编号] 1672-5654(2014)12(b)-0131-02

[作者简介] 孙永敏(1983-),河南郑州人,本科,初级检验技,师研究方向:免疫学。

甲状腺癌是常见的一种内分泌系统恶性肿瘤,近年来其发病率不断上升,其中绝大部分的癌来源是滤泡上皮细胞,其中最为常见的一种类型就是甲状腺乳头状癌,并且其颈部淋巴结转移率非常的高,该文就主要对CEACAM-1与S100A4蛋白与甲状腺乳头状癌淋巴结转移的相关性进行简单分析。收集该院2013年3月—2013年10月收治的甲状腺乳头状癌淋巴结转移患者102例,现报道如下。

1资料与方法

1.1 一般资料

该次研究中随机选取该院收治的甲状腺乳头状癌手术切除标本102例,一般情况,在开展甲状腺乳头状癌切除手术之前或者是手术过程中,需要对患者的病情予以明确的诊断,在其基础上,为患者实施颈部淋巴结扫描、甲状腺的近全切或者是全切手术,其扫描范围需要包含单侧的改良颈清或者是中央淋巴结,因此在该次研究中,在研究人员的筛选工作中,需要能够满足以下的基本条件:①对患者的甲状腺乳头状癌予以明确的诊断;②为甲状腺的近全切标本或者是甲状腺的全切标本,清扫范围最少应该包含单侧的改良颈清或者是整个中央组淋巴结;③为了对淋巴结转移的假阴性率予以有效的控制,并减少其发生率,无转移组中所包含的淋巴结个数应该>6个,转移组依据AJCC分歧中PN的条件,选择性颈清中所包含的淋巴结个数至少应该为6个,在改良根治颈清中所包含的淋巴结的个数至少应该为10个[1]。

1.2 组织学评估

该次研究中的送检标本应该放置于中性福尔马林溶液(浓度10%,中国上海,YM-S1581)中予以处理,主要的处理方法包括:固定处理、脱水处理、石蜡包埋以及切片处理,以上处理完成之后,在HE染色镜下对其予以观察,所有标本都应该确诊为甲状腺乳头状癌,应用基于特征形态学表现的诊断标准,出现特征性的核表现或者是真乳头表现,例如核沟、核内假包涵体、毛玻璃样核等,所有标本都要实施下列的临床病理学评估:侵及甲状腺包膜外、多灶、伴发桥本甲状腺炎、组织亚型、肿物包膜完整、纤维化、中午直径(>1或者是≤1 cm)、性别、年龄(≥45岁或者是<45岁)[2]。

1.3 免疫组化分析

免疫组化应用Histofine Simple Stain MAX及EnVision两步法,石蜡切片厚度为4 Lm,对其实施常规的脱蜡水化,应用3%的过氧化氢孵育10 min以便于将内源性的过氧化物酶予以阻断,根据抗体的不同,应用各种不同的抗原修复方法,抗原修复液应用的是枸椽酸盐缓冲液(规格Buffer Solution,pH4.00/pH 7.00,1 kg,含量99.9%),一抗滴加之后,室温下孵育1 h,之后在滴加辣根过氧化物酶标记的二抗,也就是Histofine Simple Stain MAX及EnVision,室温下孵育45 min之后,对于显色、苏木精复杂性、脱水、透明度、封固等的观察室在DAB显微镜(美国Labomed显微镜,上海器仁仪器)下开展,在完成以上各个步骤的过程中,都应该应用PBS缓冲液实施冲洗,依据抗体说明书,阳性对照应该采用不同的组织。

肿瘤组织中的S100A4染色细胞核及细胞质中等以上强度着色,CEACAM-1膜着色、p27kip1及cyclinD1细胞核着色则看作是肿瘤细胞的阳性着色,一旦肿瘤细胞阳性着色的染色超出10%,则视作是阳性,应用双盲法对所有的免疫组化染色切片在十倍的物镜重复观察三遍以上,如果病例的判断结果不一致,就需要重新开展免疫组化染色,以保证结果的正确性[3]。

1.4 统计方法

该次研究中相关数据的处理应用统计学软件spss13.0来进行处理,首先应用V2对相关变量实施与淋巴结转移相关的单因素分析,实现具有统计学意义的变量的筛选,并将其纳入到二项分类成组资料的非条件Logistic回归模型中实施多因素分析[4]。计数资料采用χ2检验,用百分比表示。

2 结果

CEACAM-1、S100A4蛋白在甲状腺乳头状癌标本中的检测阳性率分别为51.0%、79.4%,通过实施单因素分析,发现年龄为45岁的患者、肿物直径为1 cm的淋巴结的CEACAM-1的阴性表达与S100A4的阳性表达与甲状腺乳头状癌淋巴结转移相关,p27kip1及cyclinD1的阳性表达、侵及甲状腺包膜外、多灶、伴发桥本甲状腺炎、组织学亚型、肿物包膜完整、纤维化、性别等与淋巴结转移无关,通过进一步的多因素研究发现,年龄为45岁的患者、肿物直径为1 cm的淋巴结的CEACAM-1的阴性表达与S100A4的阳性表达是甲状腺乳头状癌淋巴结转移的独立性危险因素,其病理学特征如表1所示;临床病理参数及免疫组化表达与淋巴结转移的关系如表2所示[5]。

3 讨论

该次研究中通过对102例甲状腺乳头状癌的各种临床病理参数以及免疫组化表达与淋巴结转移的相关性进行分析,该研究结果与任立军[6]等人的研究结果基本一致。研究结果表明,甲状腺乳头状癌临床病理参数及免疫组化表达与淋巴结转移的关系研究中,年龄、肿物直径、S100A4边缘及CEACAM-1几个病例参数与淋巴结转移有直接的影响。在转移方面,年龄低于45岁的患者转移率为67.2%,肿物直径>1 cm的转移率为68.9%,S100A4边缘阴性的转移率为63.6%,CEACAM-1阴性的转移率为59.0%。几个指标与对应不转移率相比,差异有统计学意义(P<0.05)。CEACAM-1阴性表达、S100A4阳性表达、肿物直径超过1 cm的甲状腺乳头状癌淋巴结转移为相关关系,在对其实施多因素分析,可以将患者年龄45岁、肿物直径为1 cm的淋巴结的CEACAM-1的阴性表达与S100A4的阳性表达作为甲状腺乳头状癌淋巴结转移的独立性危险因素,这有利于甲状腺乳头状癌患者的临床诊断、治疗及预后。

与其他形式的癌症相比,甲状腺乳头状癌的预后比较好,患者一旦确诊,实施有效的治疗,对于患者的长期生存具有非常重要的作用,同时能够有效的改善患者的生活质量,其转移方式中最为常见的就是颈部淋巴结转移,目前临床中关于甲状腺乳头状癌患者颈部淋巴结的处理方式的选择还存在一定的争议,是否将清扫术应用于临床上没有发现淋巴结转移的甲状腺乳头状癌患者中目前还没有达成统一的意见,寻找甲状腺乳头状癌淋巴结转移的预测因素具有非常大的临床意义[7]。

CEACAM-1蛋白及S100A4蛋白在甲状腺乳头状癌中的免疫组化表达与淋巴结转移相关,CEACAM-1的阴性表达、S100A4的阳性表达对于甲状腺乳头状癌淋巴结转移具有一定的提示作用,虽然该结论在临床意义上还有待进一步研究,但是通过检测甲状腺乳头状癌术前穿刺标本中此两种蛋白的不同表达,对于是否存在淋巴结转移具有良好的预测作用,这对于临床选择术式的准确评价及预后具有非常重要的参考价值。

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[4] 吴延升,董俊峰,岳恺,等.CXCL12-CXCR4生物学轴与甲状腺乳头状癌淋巴结转移的相关性研究[J].中国肿瘤临床,2011,38(23):1439-1442.

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[6] 任立军,杨廷芳,张成雷. 甲状腺乳头状癌淋巴结转移规律的临床研究[J].中国普外基础与临床杂志,2012,18(4):419-422.

[7] 白云城,张建明,苏艳军,等.淋巴示踪剂在甲状腺乳头状癌淋巴结清扫和病理检查中的作用与比较[J].中国肿瘤临床,2013,40(17):1034-1037.

(收稿日期:2014-09-15)