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608 例泌尿生殖道支原体的检测及药敏分析

  • 投稿萨娜
  • 更新时间2015-09-16
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李拥军

山东省淄博市中心医院输血科,山东淄博 255036

[摘要] 目的 探究低离子聚凝胺技术在临床输血检验中的应用价值。方法 该院对320例受血者及供血者分别以盐水法和低离子聚凝胺技术(Manual Polybrene Test,MPT)进行交叉配血试验,分析比较两种方法的准确度、稳定性、灵敏度及平均耗时等情况。结果 盐水法平均耗时7.2 min,阳性检出率为1.88%(6/320),且6例阳性结果中只有3例在显微镜下可窥见到的特异性细胞凝集;MPT法平均耗时4.5 min,阳性检出率为4.06%(13/320),检出阳性的13例均可在显微镜下见到特异性细胞凝集。 结论 低离子聚凝胺技术在临床输血检验中具有操作简便、快速及准确度高、稳定性强、灵敏度高等优点,能有效减少输血反应,保证输血安全,具有较高的临床应用价值。

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关键词 低离子聚凝胺技术;输血检验;盐水法;应用价值

[中图分类号] R446.1 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742(2014)02(c)-0181-02

[作者简介] 李拥军(1965-),男,山东淄博人,本科,主管技师,主要从事临床输血工作,邮箱:leeyj12006@163.com。

随着医学的发展,输血已作为一种成熟的医疗手段,被广泛地应用于临床治疗和抢救过程中。输血过程中避免溶血性输血反应,保证输血安全是治疗的关键。因此,输血前需采用科学可靠的方法进行交叉配血试验,传统常用的盐水法虽然操作简便、成本低,但只能检出不相匹配的LgM抗体,而对不完全抗体IgM无法进行检出[1],存在一定的局限性,无法满足大量需求和交叉配血时间紧迫。低离子聚凝胺技术 (Manual Polybrene Test,MPT)对IgM抗体和IgG抗体检验效果好,且试验过程简单、易于操作、结果准确、灵敏度高,便于常规和急诊配血。为了探究低离子聚凝胺技术在临床输血检验中的应用价值,该院2012年1月—2013年1月对320例受血者及供血者采用盐水法和MPT法进行交叉配血试验,并对比了两种方法的试验结果,现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取该院收治的320例受血者为研究对象,其中男176例,女144例;年龄3~69岁,平均年龄35.5岁;320例患者无严重血液疾病,所有血样均采用盐水法和MPT法进行交叉配血试验。

1.2 试验原理

聚凝胺(又名溴化己二甲铵)是一种高价阳离子聚合物,当红细胞悬液中加入聚凝胺后,产生了大量正电荷,继而使得红细胞表面唾液酸所带的负电荷中和,提高了分子活性,使红细胞相互接近,并发生非特异性凝集。在加入重悬液后红细胞凝集散开,红细胞未被致敏的会出现可逆的非特异性凝集,属于阴性反应;在加入重悬液后红细胞凝集不散开,红细胞被致敏的会出现不可逆的非特异性凝集,属于阳性反应[2],由此可特异性地检出相应的血型Ag或Ab(IgG、IgM)。

1.3 试剂与仪器

该研究中MPT法采用的聚凝胺介质试剂盒为珠海贝索生物技术有限公司产品,试剂有低离子溶液、重悬液、凝聚胺溶液等。盐水法选用普通生理盐水为介质。仪器:试管、显微镜、离心机、电热恒温水箱等。

1.4 方法

MPT法:取两支试管,分别标注受血者、供血者的姓名,区分主测管、次测管。加入2滴受血者血清、1滴3%的供血者红细胞悬液于主测管中,加入2滴供血者血清、1滴3%的受血者红细胞悬液于次测管中。然后,加入低离子介质0.7 mL于两支试管中,混匀,室温下静置1 min后加入2滴凝聚胺溶液,混匀,室温静置15 s,用离心机3 000 r/min(相当于1 000 g离心力)18 s,倒掉上清液,使管底剩余0.1 mL液体。轻摇试管,观察到试管出现明显凝集后,在主测管及次测管中滴入2滴重悬液,轻摇试管,再次观察试管中是否有红细胞凝集,如有则判断为阳性;若红细胞凝集消失,则判断为阴性。

盐水法:按照《全国临床检验操作规程》相关规定规范操作。盐水法与MPT法同步进行。

2 结果

采用盐水法和MPT法对320例血样进行交叉配血试验,结果显示,MPT法过程简单、操作简便,平均耗时4.5 min,明显少于盐水法(平均耗时7.2 min)。MPT法准确率高,320例中有13例检测结果呈阳性,阳性检出率为4.06%;稳定性强、灵敏度高,阳性结果中的13例样本在显微镜下均可见特异性细胞凝集。传统盐水法准确率相对较低,稳定性一般,灵敏度一般,320例样本中只检出6例阳性结果,3例可见特异性细胞凝集,阳性检出率为1.88%。见表1。

3 讨论

为了规范医疗机构合理用血,推广科学用血技术,保证临床用血的安全,国家卫生和计划生育委员会(原卫生部)于2000年6月根据《医疗机构临床用血管理办法》制定了《临床输血技术规范》,为输血医务人员提供正确、安全、规范地从事输血工作的纲领性文件[3]。凡输注全血、浓缩红细胞、红细胞悬液、洗涤红细胞、冰冻红细胞、浓缩白细胞、手工分离浓缩血小板等患者,应进行交叉配血试验,以避免溶血性反应,保证输血安全。因此,输血前必须对供血样本和受血者进行交叉配血试验,而交叉配血试验方法对试验结果有着重要的影响。目前临床常用的有盐水法、MPT法等,传统的盐水法虽然操作简单、费用低廉,但只能检出IgM抗体,不能检出不配合的IgG抗体,这就降低了准确率,一旦造成漏检就可能引起输血反应。可见,盐水法准确率不高,且无法满足临床应用的需求。而MPT法能检出完全抗体和不完全抗体,能促进红细胞及不规则抗体的反应[4],且此方法灵敏度高、准确度高,操作简单、价格低廉,适合基层医院广泛应用。MPT法作用原理是通过低离子介质降低介质的离子强度,从而促进红细胞和相应抗体发生反应。在MPT法试验过程中,红细胞悬液中滴入聚凝胺溶液后,产生大量正电荷,继而使得红细胞表面的负电荷中和,红细胞表面的电位降低,从而提高了分子活性,使得红细胞发生非特异性凝集,当加入重悬液后,凝集现象不消失。

该组试验通过对比盐水法和MPT法的临床应用,得出盐水法虽然操作简单、成本低,但其检测不出不规则抗体,对ABO以外的抗体不能检测,其中不规则的抗体大多为IgG类,主要是由于免疫刺激、输血、妊娠产生,通过盐水法不能被凝集,只有被致敏的相应抗原才能够出现凝集[5]。而MPT法不仅操作简单、费用低廉,更重要的是能同时检出完全抗体和不完全抗体,避免迟发性溶血反应发生,避免漏检,可为临床治疗诊断提供参考依据[6]。该研究过程中发现聚凝胺法是从凝集到无凝集的一个发生过程,因此,试验过程中要注意解聚的时间和掌握试管振摇的力度。MPT法平均耗时4.5 min,略少于祁蕙燕[7]研究中的6 min,应考虑样本数量及试验人员操作成熟度的影响。该组盐水法、MPT法的阳性检出率均略高于龙亚银[8]的研究数据,应考虑检验样本中有无溶血性患者及长期输血史患者,溶血性患者及长期输血患者所占比例越高,阳性检出率越高。因此,MPT法与盐水法具有准确性高、稳定性强、操作简单等优点,可快速准确的检测出不规则抗体IgG,不会发生漏检现象,具有很好的应用价值,值得在各医院推广使用。

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参考文献

[1] 陈欣荣.交叉配血方法应用效果评价[J].中国医药指南,2013,11(8):574-575.

[2] 叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].3版.南京:东南大学出版社,2006:258.

[3] 赖顺华,蔡国斌,徐小丹.浅谈低离子聚凝胺技术在临床输血检验中的应用价值[J].中国医药指南,2012,10(33):96-97.

[4] 叶旭英,曹颖.低离子聚凝胺用于输血检验价值分析[J].中外医学研究,2013,11(11):45-46.

[5] 秦江萍.低离子凝聚胺技术在临床输血检验中的应用[J].现代诊断与治疗,2012,23(12):2207-2208.

[6] 许子珍.聚凝胺配血法与盐水交叉配血法的应用效果比较[J].吉林医学,2013,34(23):4775.

[7] 祁蕙燕.聚凝胺交叉配血试验在临床输血中的应用体会[J].青海医药杂志,2012,42(11):59-60.

[8] 龙亚银.低离子聚凝胺法与盐水法交叉配血效能的比较[J].广东医学院学报,2003,21(4):372-373.

(收稿日期:2014-01-22)