刘小波
成都市龙泉驿区疾病预防控制中心检验科，四川成都 610100
[摘要] 目的 探讨痰标本的性状与采集时间对于痰涂片抗酸杆菌阳性检出率的影响。方法 采用萋-尼氏染色方法对不同性状与不同采集时间的痰标本进行分析。结果 1221例痰标本中，不同性状与不同采集时间的痰标本中，抗酸杆菌阳性检出率差异均较显著，P＜0.05，有统计学意义。结论 不同性状、不同采集时间的痰标本对于痰涂片抗酸杆菌阳性检出率有着非常大的影响，应该引起重视。
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关键词 ] 痰标本；抗酸杆菌；阳性
[中图分类号] R446 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2014）06（a）-0029-02
萋-尼氏染色法作为对结核病进行诊断的首选方法，不仅操作方便快捷，而且成本低、特异性较高，能够有效地提高抗酸杆菌阳性检出率，对结核病的传播做到有效控制与预防[1-3]。本文选取我中心2011年全年的1221例可疑肺结核患者的痰标本作为研究对象进行研究，检测结果如下。
1研究对象
1.1研究对象
来源于我中心2011年全年的1221例可疑肺结核患者的痰标本,采集于三个有代表性的时间段，即即时痰、夜间痰与晨痰。1221例患者中，男性721例，女性500例，年龄在14~81岁之间，平均年龄为（49±13.5）岁。
1.2痰标本分类
1.2.1不同性状 按照痰标本的不同性状，主要分为干酪痰、粘液痰、血痰与唾液（或口水），其中干酪痰主要以奶酪色（或黄色）为主，呈团块状、脓样。粘液痰的外观主要以白色为主；血痰外观主要以鲜红色、褐色或者深褐色为主；唾液（或口水）的外观以透明或者半透明颜色为主，是一种不合格的痰标本[4]。
1.2.2不同采集时间 即时痰为患者就诊时，在其深呼吸以后所咳出的痰；夜间痰为患者在送痰的前一天，夜间咳出的痰；晨痰为患者晨起用清水漱口以后，咳出的第2、3口痰[5-6]。
1.3使用仪器及试剂
显微镜：MoticBA200双目显微镜（由北京翔天智远科技有限公司生产）；海尔HR40-ⅡA2生物安全柜（国食药监械准字2007第3540043号）；痰标本杯为国际通用的螺旋盖、广口状的一次性塑料痰杯(康健医疗，江苏)；抗酸染液：由珠海贝索生物技术有限公司（台资）提供。
1.4检查方法
1.4.1制作痰涂片 提前用浓度为95%的乙醇对待用玻片进行脱脂处理，经过干燥后，需再次检查玻片是否清洁、有无油污或划痕，选取合格玻片备用，在玻片的背面左侧1/3处标注编号，挑取可疑痰标本按要求涂抹成20 mm×10 mm的卵圆形痰膜。
1.4.2萋-尼氏染色 将痰标本涂抹于玻片之后进行自然干燥，随后放置于染色架上用酒精灯加热固定(在5 s内将玻片置于火焰上来回烘烤四次)，玻片之间的距离要大于10 mm。将石碳酸复红染液滴于痰膜上，使其覆盖整个痰膜,再用酒精灯进行加热，在蒸汽出现后移开酒精灯，染色5 min。然后用流水从玻片的一侧将染液缓慢冲去，并将标本上剩余的水沥干。再对痰膜进行脱色处理，保持1 min，再用同样的方法将脱色液冲去，将水沥干，最后滴加浓度为2%的亚甲基蓝溶液（由上海恒远生物科技有限公司生产）复染30 s。对其进行流水冲洗，干燥后，使用双目显微镜进行检查。
1.5判定标准
按照萋-尼氏染色镜检结果的分级报告标准[7-8]对检查结果进行判定。
1.6统计学方法
应用spss 16.0软件对数据进行统计学分析，计数资料用χ2检验；计量资料用（x±s）表示，t检验中P<0.05表示结果对比的差异有统计学意义。
2结果
2.1痰标本涂片的抗酸杆菌筛查结果
1221例可疑肺结核患者中共284例确诊为活动性肺结核，其中178例抗酸杆菌呈阴性，106例抗酸杆菌呈阳性，总体阳性检出率为8.68%。
2.2 284例活动性肺结核患者不同采集时间的痰标本抗酸杆菌阳性检出结果
三种不同采集时间的痰标本中，晨痰的阳性检出率最高，为37.32%；即时痰的阳性检出率最低，为10.21%，不同采集时间痰标本的抗酸杆菌阳性检出率的差异非常明显，P＜0.05，有统计学意义。结果如表1所示。
2.3 284例活动性肺结核患者的不同性状痰标本抗酸杆菌阳性检出结果
四种不同性状的痰标本中，干酪痰的阳性检出率最高，为56.34%；唾液（或口水）的阳性检出率最低，为0。不同性状痰标本的抗酸杆菌阳性检出率的差异非常明显，P＜0.05，有统计学意义。结果如表2所示。
3讨论
本次研究采用萋-尼氏染色方法，通过对不同性状、不同采集时间的痰标本进行研究与分析，得出痰标本性状或采集时间的不同均会对痰涂片抗酸杆菌阳性检出率产生明显的影响，其中不同性状的痰标本中，干酪痰的阳性检出率最高（56.34%），唾液（或口水）的阳性检出率最低（0）；不同采集时间的痰标本中，晨痰的阳性检出率最高(37.32%)，即时痰的阳性检出率最低(10.21%)。结果经统计学分析对比证明，不同性状及不同采集时间的痰标本中涂片抗酸杆菌的阳性检出率组间差异明显，有统计学意义。
据有关研究表明[9-10]，在进行痰涂片镜检的可疑患者中，抗酸杆菌的平均阳性检出率大约为15%，然而在这些涂阳患者中，肺结核的患病率也有很大不同，患病率的范围在5%~30%之间。根据本文的研究结果，有针对性的采集疑似病例的晨痰，以及痰样本中的干酪痰，能够明显地提高肺结核控制的痰检工作中抗酸杆菌的阳性检出率。
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（收稿日期：2014-03-15）